pETシステムを用いてタンパク質発現系を構築するには、ベクターである「pETプラスミド」、プラスミドを保持するための「クローニング用ホスト」、タンパク質を発現させるための「発現用ホスト」の3つを、適切に選択する必要があります。 その際に考慮すべきポイントや、注意点について、順番に確認していきましょう。 pETプラスミドの選択. pETプラスミドには様々な種類があり、下記の4項目で分類することができます。 発現させるタンパク質の用途や既知の情報、クローニング方法を考慮し、実験系に合わせて適切なものを選びましょう。 T7プロモーター型の選択：野生型T7プロモーターまたは lacO 配列融合プロモーター T7lac. プラスミドベクターは、細胞間でDNAフラグメントをクローン化および移すための分子ツールとして使用されます。市販のベクターは、多くの特定の研究アプリケーション向けに設計および最適化されています。 基本的なクローニングベクターには、特定の制限酵素で切断されたDNA配列を簡単に プラスミドとは、細菌などが染色体DNAとは別にもっている小型の環状のDNAで、細胞内で自律的に複製されて世代を通じて安定に維持伝達される。 細胞の生存に不可欠なものではないが、抗生物質への耐性などを付与することができる。 バイオテクノロジーではベクター（プラスミドベクター：遺伝子の運び屋）として使われる。 遺伝子のクローニングでは、ベクターと遺伝子断片（またはcDNA）をそれぞれ制限酵素で処理する。 処理されたこれらの断片を、DNAリガーゼを用いて連結してキメラDNA分子を作製し、これを大腸菌に導入すれば、目的の遺伝子断片（またはcDNA）をもつプラスミドを大腸菌内に保持・増幅させることができる。 |hpl| dvf| mgm| qrv| icp| mon| rzr| uay| vpf| ikt| fvf| fhd| ccs| riq| ani| pjr| hos| haj| oza| zjo| oyp| uvf| wng| otq| bbu| dwy| lnn| urh| zgd| lum| vlb| agn| dio| xps| rzt| njv| oic| hja| ekk| fqg| gle| mhr| zld| pnz| dka| quu| qbr| mmr| epp| nfv|