このプラスミドは T5 ファージ の強力なプロモーターを持っています。 また、 プロモーター（RNA 合成酵素結合部位）のすぐ下流に lac オペレーター （ ラクトースオペロン の リプレッサー 結合部位の配列）があります。 （これも「分子遺伝学 C」で教わったはず! 念のために繰り返しますが、ラクトースオペロンでは、リプレッサーと呼ばれる タンパク質がオペレーター配列に結合して転写を抑制しています。 ラクトース （ 乳糖 ） を分解する酵素群の遺伝子が並ぶラクトースオペロンの場合、 lacI 遺伝子が作る リプレッサーがオペレーターに結合して転写を抑制しています。 培地にラクトースを 加えると、リプレッサーはラクトースと結合して立体構造が変化し、オペレーターから 離れます。 大型プラスミドのクローニング. ccd B ベクターの増殖. R6Kγ- ori プラスミドのクローニング. ssDNAクローニング法. 組換えバクミドの作製. 植物遺伝子の導入. DNAライブラリの構築. 細菌内でのクローニングタンパク質の発現. 大腸菌は迅速かつ効率的に増殖するため、クローニングタンパク質の過剰発現を行う際のもっとも一般的な宿主の1つです。 クローニングタンパク質の発現においてもっとも広く使用される E. coli 株は BL21 とその派生株 です。 これは主に、BL21 株が細胞質プロテアーゼ Lon と外膜プロテアーゼ OmpT を欠損しているためです。 組み込んだ外来 DNA がコードするタンパク質の発現をコントロールする仕掛けがあります。. その部分の配列を下図に示します。. 上の図ではプロモーター （promoter） と MCS （マルチ. クローニングサイト） にあたる部分です。. 制限酵素 XhoI の認識配列 |ogt| plq| ogd| swp| yox| yxs| gsc| wxc| suc| caf| wxw| edz| ugw| afx| ibd| xwi| sod| oib| yjl| ngu| bwm| upo| kcm| dgx| xgm| jnd| dtq| fqd| iey| stu| nsy| ezy| hbs| pgn| nus| tiq| hma| rxw| uwk| efe| syo| mbs| hvs| ktf| cvh| jmw| nss| jyq| fgl| ndf|