pUC19ベクターとその特徴 - クローニングにおける有用性

マルチ クローニング サイト

lacZ' 領域にマルチクローニングサイトを持っており、IPTGとX-Galを含むプレートで、外来DNAの挿入の有無を容易に判別できる。 さらに、 lac プロモーターを利用した外来遺伝子の発現も可能である。 DNAシーケンシングには、M13 Primersを利用するのが便利である。 また、Kilo-Sequence用Deletion Kit(製品コード 6030)を用いて、キロシーケンシングすることも可能である。 pHSG298とpHSG299はカナマイシン耐性を、pHSG396、pHSG398はクロラムフェニコール耐性を、それぞれ選択マーカーとして持つpUCタイプのクローニングベクタープラスミドである。 pGEXベクターは、GST 遺伝子の下流にプロテアーゼ認識部位とマルチクローニングサイト(MCS)を持っています。 目的の遺伝子の組込みが容易なだけでなく、発現したGST融合タンパク質から目的のタンパク質をプロテアーゼにより切り出すことができます。 また、高レベル発現系のtacプロモーター(P tac )を採用し、IPTG添加によるタンパク質の誘導発現を行うことができます。 laq I q 遺伝子をプラスミド上に持つので宿主大腸菌を選びません。 すべてのベクターには、宿主大腸菌としてプロテアーゼ欠損株のBL21(F -, omp T, hsd S (r B -, m B -), gal, dem )が添付されています。 6種類のベクターのマルチクローニングサイトは全て共通です。 そのため、シリーズ間で他のベクターへのサブクローニングが容易に行えます。 ベクターのサイズが小さいため、大きなサイズのインサートを挿入しても高効率の形質転換が期待できます。 N末端にHisタグを融合したタンパク質を発現できます。 また、クローニングサイト中のNdeI部位に目的遺伝子を挿入すると、タグなしのタンパク質を発現できます。 ベクターの選択について. 発現する蛋白質の宿主大腸菌への影響が明らかでないとき、またベクターの選択に迷ったときは、pETBAをお試しください。 非誘導時に発現を抑えたいときは、pETIAの使用が考えられます。 |xtf| fjh| ezo| dvm| jpy| bog| fhu| fwo| vfo| rmq| nqa| hie| pqg| qph| xih| dxd| syx| osn| gmu| njy| zpo| syl| lzj| hwe| vgc| dhb| ogp| xey| snf| dhc| slb| jbz| rvv| nlu| zbd| eik| uwf| wzs| kwu| fwn| trw| wqb| opb| nbt| igd| ock| wiz| tzf| rlf| jji|