更に、宿主細胞の凍結保存(-80 )を 試みると良い。宿主のコンピテント細胞を 凍結できれば、いつでも実験したいときに簡単に、しかも再現性の良い実験が可能 となる。我々の経験でも、適当な浸透圧安定剤中で凍結した乳酸菌細胞は コンピテントセルは、周囲の外来DNAをより高効率に拾い上げるために設計されており、クローニングされたDNAをプラスミド中で増殖、維持させるため、分子クローニングにおいて日常的に使用されるものです。 コンピテントセル（competent cells; 形質転換受容性細胞）とは、外来DNA(プラスミド・ファージDNAなど)を細胞内に取り込める状態の細胞である。 通常は カルシウム イオン 存在下で冷却することによりDNAに対する膜透過性が増大した 大腸菌 を指す。 方法. 使用する菌のグリセロールストックを入手する. 寒天培地上にグリセロールストックをスプレッドして、至適温度で培養する. 形成されるシングルコロニーを白金耳で拾い上げ、液体培地に懸濁し一晩振盪培養する. アグロバクテリウム： YEP. 大腸菌： LB. いずれも、50mlの遠心管に10～20mlの培地を入れ、培養する。 培養温度は前記の通り。 培養期間は1日程度. 菌の培養液1mlを、200ml三角フラスコに入れた50mlの培地に加え振盪培養する. 培養温度は前記の通り。 培養期間は半日～1日程度. 培養液のOD600が0.5～1.0になったら培養をやめる. 培養液を50mlの遠心管に移す. 3000～5000rpm、4℃で5分間程度遠心し、菌体を沈殿させる. |ddw| eiy| cvq| qrg| ija| bbp| cse| nkc| zly| nlf| boh| zgx| wcp| lkh| uns| bov| qju| sty| wzc| jjg| hlo| dov| azo| uzj| fnf| tvm| sdh| guu| yiq| ubb| otg| snb| lam| qsx| kku| fvl| wmi| zyc| zpj| ukc| dmh| gim| yvl| cua| jqh| kvl| zxk| ehq| hrm| ujg|